การใช้เครื่อง UV-Visible Spectrophotometer ในการวัดค่าดูดกลืนแสง
เครื่อง UV-Visible Spectrophotometer หรือเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์รังสีอัลตราไวโอเลต-แสงที่ตามองเห็น เป็นเครื่องมือวิเคราะห์ที่สำคัญในงานทางเคมี ชีวเคมี วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม และเภสัชกรรม โดยอาศัยหลักการของการดูดกลืนแสง (Absorbance) ของสารในช่วงความยาวคลื่นระหว่าง 200 ถึง 800 นาโนเมตร ซึ่งสามารถใช้วิเคราะห์ปริมาณของสารที่ต้องการตรวจสอบได้อย่างแม่นยำ
หลักการทำงานของเครื่อง UV-Visible Spectrophotometer
เครื่อง UV-Vis Spectrophotometer ทำงานโดยการฉายแสงจากแหล่งกำเนิดผ่านปริซึมหรือระบบกระจายแสง เพื่อแยกแสงออกเป็นช่วงความยาวคลื่นที่ต้องการ จากนั้นแสงจะผ่านตัวอย่างในเซลล์ใส (cuvette) และตรวจวัดปริมาณแสงที่ผ่านหรือถูกดูดกลืนโดยสารในตัวอย่าง
ค่าการดูดกลืนแสง (Absorbance หรือ A) จะสัมพันธ์กับความเข้มข้นของสารในตัวอย่าง ตามกฎของเบียร์-ลอมเบิร์ต (Beer-Lambert Law): A=ε⋅b⋅cA = \varepsilon \cdot b \cdot cA=ε⋅b⋅c
โดยที่
- AAA = ค่าดูดกลืนแสง
- ε\varepsilonε = ค่าสัมประสิทธิ์การดูดกลืนเฉพาะของสาร (L/mol·cm)
- bbb = ความยาวของทางเดินแสง (cm)
- ccc = ความเข้มข้นของสาร (mol/L)
ขั้นตอนการใช้งานเครื่อง UV-Visible Spectrophotometer
- เตรียมสารละลายตัวอย่าง: ควรเตรียมสารให้มีความเข้มข้นเหมาะสม ไม่เข้มเกินไปเพื่อไม่ให้เกิดค่าดูดกลืนเกินช่วงที่เครื่องวัดได้
- เลือกความยาวคลื่น (Wavelength): เลือกความยาวคลื่นที่เหมาะสมกับสารที่ต้องการวัด โดยทั่วไปจะเลือกที่ค่าการดูดกลืนแสงสูงสุด (λmax\lambda_{\text{max}}λmax)
- ตั้งค่าเครื่องและวัดค่า blank: เติมสารละลายตัวทำละลายเปล่าลงใน cuvette แล้ววัดเพื่อใช้เป็นค่ามาตรฐาน (blank)
- วัดค่าตัวอย่าง: เติมสารละลายตัวอย่างลงใน cuvette แล้ววัดค่าดูดกลืนแสง
- วิเคราะห์ข้อมูล: นำค่าที่ได้มาใช้ในการคำนวณความเข้มข้น หรือสร้างกราฟมาตรฐาน (calibration curve)
การประยุกต์ใช้งาน
- การวิเคราะห์หาความเข้มข้นของสารในสารละลาย เช่น วิตามิน, สารอินทรีย์, โลหะหนัก
- การตรวจสอบคุณภาพของผลิตภัณฑ์ในอุตสาหกรรมยา อาหาร และเครื่องสำอาง
- การวิเคราะห์ตัวอย่างในงานวิจัยทางเคมี ชีวภาพ และสิ่งแวดล้อม
ข้อดีของการใช้เครื่อง UV-Vis Spectrophotometer
- แม่นยำและรวดเร็ว
- ใช้งานง่าย
- ใช้ปริมาณตัวอย่างน้อย
- เหมาะกับการวัดสารที่มีโครงสร้างดูดกลืนแสงเฉพาะ
ข้อจำกัด
- ไม่สามารถวัดสารที่ไม่มีโครงสร้างดูดกลืนแสงในช่วง UV หรือ Visible ได้
- ความแม่นยำขึ้นอยู่กับการเตรียมสาร ตัวทำละลาย และความสะอาดของ cuvette
สรุป
การใช้เครื่อง UV-Visible Spectrophotometer เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพในการวัดค่าดูดกลืนแสงของสาร ซึ่งสามารถนำไปใช้ในการวิเคราะห์เชิงปริมาณของสารต่าง ๆ ได้อย่างแม่นยำ เหมาะสำหรับงานวิจัยและการควบคุมคุณภาพในหลายอุตสาหกรรม
สนใจสอบถาม/สั่งซื้อ ทักเลย!
บริษัท แอ๊กโซ เคมิคอลส์ แอนด์ เซอร์วิสเซส จำกัด
โทร 02 346 9239 ต่อ 11 หรือ Line @axxochem
www.axxo.co.th หรือ sales_chem@axxo.co.th