Tel: +66 62 417 8298
Email: sales_chem@axxo.co.th
HOME AXXOPRODUCTSPROMOTION

HOME AXXO

STANDARD SOLUTIONS AND INSTRUMENTS AND FEATURED PRODUCTS

Read More

PRODUCTS

PRODUCTS => BRANDS AND APPLICATIONS

Read More

PROMOTION

TODAY'S PROMOTION

Read More

Protein Separation Using Centrifuge

การแยกโปรตีนโดยใช้เครื่อง Centrifuge

การแยกโปรตีนเป็นกระบวนการสำคัญในงานวิจัยทางชีววิทยา ชีวเคมี และเทคโนโลยีชีวภาพ เพื่อให้ได้โปรตีนบริสุทธิ์สำหรับการศึกษาโครงสร้าง หน้าที่ หรือการใช้ในทางการแพทย์ เครื่องหมุนเหวี่ยง (Centrifuge) เป็นอุปกรณ์หลักที่ช่วยแยกโปรตีนออกจากสารละลาย โดยอาศัยแรงเหวี่ยงหนีศูนย์กลางที่ทำให้โมเลกุลโปรตีนตกตะกอนตามขนาดและความหนาแน่นของมัน

หลักการแยกโปรตีนด้วย Centrifuge

การใช้เครื่อง Centrifuge ในการแยกโปรตีนอาศัยหลักการของแรงเหวี่ยงหนีศูนย์กลาง (Centrifugal Force) เพื่อเร่งอัตราการตกตะกอนของโมเลกุลโปรตีนที่ละลายในสารละลาย เทคนิคที่นิยมใช้ในการแยกโปรตีนประกอบด้วย

  1. Differential Centrifugation – การหมุนเหวี่ยงเพื่อแยกโปรตีนตามขนาดและความหนาแน่น
  2. Density Gradient Centrifugation – การใช้สารละลายที่มีความหนาแน่นแตกต่างกันเพื่อให้โปรตีนตกตะกอนที่ตำแหน่งที่เหมาะสม
  3. Ultracentrifugation – ใช้ความเร็วสูงเพื่อแยกโปรตีนที่มีขนาดเล็กมาก เช่น โปรตีนเมมเบรนหรือซับเซลลูลาร์คอมโพเนนต์

ขั้นตอนการแยกโปรตีนโดยใช้ Centrifuge

1. การเตรียมตัวอย่างโปรตีน

  • เก็บตัวอย่างจากเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่ต้องการ
  • ทำให้เซลล์แตกตัว (Cell Lysis) โดยใช้สารทำลายเยื่อหุ้มเซลล์ เช่น Triton X-100, SDS หรือ Sonication
  • ใช้บัฟเฟอร์ที่เหมาะสม เช่น PBS หรือ Tris-HCl เพื่อรักษาเสถียรภาพของโปรตีน

2. การหมุนเหวี่ยงแบบแยกตะกอน (Differential Centrifugation)

กระบวนการนี้ใช้แรงเหวี่ยงหลายระดับเพื่อแยกโปรตีนที่มีขนาดและความหนาแน่นต่างกัน

  • ความเร็วต่ำ (1,000–3,000 × g, 10 นาที): กำจัดเศษเซลล์ขนาดใหญ่
  • ความเร็วปานกลาง (10,000–20,000 × g, 20–30 นาที): แยกออร์แกเนลล์ เช่น ไมโตคอนเดรีย
  • ความเร็วสูง (50,000–100,000 × g, 1–2 ชั่วโมง): แยกโปรตีนเมมเบรน หรือไรโบโซม

3. การหมุนเหวี่ยงแบบความหนาแน่นแนวตั้ง (Density Gradient Centrifugation)

ใช้สารละลายที่มีความหนาแน่นแตกต่างกัน เช่น ซูโครสหรือซีเซียมคลอไรด์ เพื่อให้โปรตีนตกตะกอนตามความหนาแน่นที่เหมาะสม

  • Rate-Zonal Centrifugation: แยกโปรตีนตามขนาด
  • Isopycnic Centrifugation: แยกโปรตีนตามความหนาแน่น

4. การตกตะกอนโปรตีน (Protein Precipitation)

ใช้สารเคมีช่วยให้โปรตีนตกตะกอนก่อนหมุนเหวี่ยง เช่น

  • แอมโมเนียมซัลเฟต (Ammonium Sulfate Precipitation)
  • ไตรคลอโรอะซิติกแอซิด (TCA Precipitation)
  • เอทานอล หรือ อะซีโตน เพื่อละลายโปรตีนออกจากของเหลว

5. การเก็บและวิเคราะห์โปรตีน

  • นำตะกอนโปรตีนที่ได้ไปละลายในบัฟเฟอร์ เช่น Tris-HCl
  • วิเคราะห์โปรตีนโดยใช้เทคนิคต่างๆ เช่น SDS-PAGE, Western Blot หรือ Mass Spectrometry

เครื่อง Centrifuge ที่ใช้ในการแยกโปรตีน

  • Microcentrifuge: สำหรับตัวอย่างขนาดเล็ก 1.5–2 mL
  • High-speed centrifuge: สำหรับตัวอย่างปริมาณมาก 50–100 mL
  • Ultracentrifuge: สำหรับการแยกโปรตีนที่มีความละเอียดสูง

การประยุกต์ใช้การแยกโปรตีน

  • ศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของโปรตีน
  • แยกเอนไซม์หรือโปรตีนเพื่อการผลิตยา
  • วิเคราะห์โปรตีนในงานวิจัยทางการแพทย์และเทคโนโลยีชีวภาพ

สรุป

การแยกโปรตีนโดยใช้เครื่อง Centrifuge เป็นกระบวนการสำคัญที่ช่วยให้ได้โปรตีนบริสุทธิ์และมีประสิทธิภาพสูง เทคนิคต่างๆ เช่น Differential Centrifugation และ Density Gradient Centrifugation ช่วยให้สามารถแยกโปรตีนตามขนาดและความหนาแน่นได้อย่างแม่นยำ เพื่อให้เหมาะสมกับการวิจัยและการวิเคราะห์ในสาขาต่างๆ

HOME AXXO

STANDARD SOLUTIONS AND INSTRUMENTS FEATURED PRODUCTS

Read More
ABOUT

ABOUT AXXO CHEMICALS AND SERVICES CO. LTDAxxo Chemicals and Services Co.,Ltd., established as a result of the rapid development in science, is acompany that provides scientific equipment and chemicals used […]

Read More
NEWS & EVENT

🎊 บริษัทแอ๊กโซ เคมิคอลส์ แอนด์ เซอร์วิสเซส จำกัด เข้าร่วมงาน การประชุมวิชาการ วิทยาศาสตร์การแพทย์ ครั้งที่ 32“นวัตกรรมวิทยาศาสตร์การแพทย์จากแล็บสู่ชีวิต” Medical Sciences Innovations : From lab to life ☘️🩺 บริษัทแอ๊กโซ เคมิคอลส์ แอนด์ เซอร์วิสเซส จำกัด เข้าร่วมงาน 7th International Conference and […]

Read More
CONTACT

www.axxo.co.th Axxo Chemicals and Services Co.,Ltd.บริษัท แอ๊กโซ เคมิคอลส์ แอนด์ เซอร์วิสเซส จำกัด10/13 Soi Krung Thep Kritha 7, Huamak, Bangkapi, Bangkok 1024010/13 ซอยกรุงเทพกรีฑา 7 แขวงหัวหมาก เขตบางกะปิ กรุงเทพมหานคร 10240Tel : 02 3469 239 […]

Read More