การวัดค่าความเข้มข้นของสารโดยใช้เครื่อง UV-Visible Spectrophotometer

ในการวิเคราะห์ทางเคมี การวัดค่าความเข้มข้นของสารละลายเป็นกระบวนการพื้นฐานที่มีความสำคัญอย่างยิ่ง เครื่อง UV-Visible Spectrophotometer เป็นเครื่องมือวิเคราะห์ที่นิยมใช้กันอย่างแพร่หลาย โดยเฉพาะในการวิเคราะห์เชิงปริมาณของสารที่สามารถดูดกลืนแสงในช่วงรังสีอัลตราไวโอเลต (UV) และแสงที่ตามองเห็น (Visible) ได้

หลักการของเครื่อง UV-Visible Spectrophotometer

เครื่อง UV-Visible Spectrophotometer ทำงานบนพื้นฐานของการดูดกลืนแสง (Absorption) ของสารในช่วงความยาวคลื่นระหว่าง 200-800 นาโนเมตร เมื่อแสงผ่านตัวอย่างในเซลล์ใส (cuvette) สารที่อยู่ในตัวอย่างจะดูดกลืนพลังงานบางส่วนไว้ และเครื่องจะวัดปริมาณแสงที่ผ่านออกมา เพื่อคำนวณค่าการดูดกลืนแสง (Absorbance)

ค่าการดูดกลืนแสงนี้มีความสัมพันธ์กับความเข้มข้นของสารตามกฎของ เบียร์-ลอมเบิร์ต (Beer-Lambert Law): A=ε⋅b⋅cA = \varepsilon \cdot b \cdot cA=ε⋅b⋅c

โดยที่

• AAA = ค่าการดูดกลืนแสง (Absorbance)
• ε\varepsilonε = ค่าสัมประสิทธิ์การดูดกลืนเฉพาะของสาร (L/mol·cm)
• bbb = ความยาวทางเดินของแสง (cm)
• ccc = ความเข้มข้นของสารในสารละลาย (mol/L)

ขั้นตอนการวัดค่าความเข้มข้นของสาร

• เตรียมสารละลายมาตรฐาน (Standard Solutions)
  เตรียมสารละลายมาตรฐานในระดับความเข้มข้นต่าง ๆ อย่างถูกต้องแม่นยำ
• วัดค่าการดูดกลืนแสงของสารละลายมาตรฐาน
  ใช้เครื่อง UV-Vis Spectrophotometer วัดค่าการดูดกลืนแสงของแต่ละสารละลายมาตรฐานที่ความยาวคลื่นที่เหมาะสม
• สร้างกราฟมาตรฐาน (Calibration Curve)
  สร้างกราฟโดยแกน x คือ ความเข้มข้นของสาร (mol/L หรือ mg/L) และแกน y คือ ค่า Absorbance
• วัดค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่างจริง (Unknown Sample)
  วัดค่า Absorbance ของตัวอย่างสารที่ต้องการวิเคราะห์
• คำนวณหาความเข้มข้น
  เปรียบเทียบค่าที่ได้กับกราฟมาตรฐาน เพื่อนำมาใช้คำนวณหาค่าความเข้มข้นของสารในตัวอย่าง

ตัวอย่างการประยุกต์ใช้

• การวัดปริมาณไนเตรตในน้ำ
• การวิเคราะห์ปริมาณวิตามินในผลิตภัณฑ์อาหารหรือยา
• การตรวจสอบคุณภาพของสารเคมีหรือสารชีวภาพ

ข้อดีของการใช้เครื่อง UV-Vis

• ความแม่นยำสูงในการวัด
• วิเคราะห์ได้รวดเร็ว
• ใช้ตัวอย่างในปริมาณน้อย
• เครื่องมีความเสถียรและสามารถใช้งานได้หลากหลาย

ข้อควรระวัง

• ควรล้าง cuvette ให้สะอาดก่อนใช้งานทุกครั้ง
• หลีกเลี่ยงการใช้ cuvette ที่เป็นรอยหรือมีฟองอากาศ
• ต้องเลือกความยาวคลื่นให้เหมาะสมกับสารที่ต้องการวัด
• ต้องตั้งค่าศูนย์ (zero) ด้วย blank solution ก่อนวัดตัวอย่าง

สรุป

การวัดค่าความเข้มข้นของสารโดยใช้เครื่อง UV-Visible Spectrophotometer เป็นเทคนิคที่มีความแม่นยำและเชื่อถือได้ เหมาะสำหรับการวิเคราะห์สารในห้องปฏิบัติการทุกระดับ ตั้งแต่งานวิจัยไปจนถึงการควบคุมคุณภาพในอุตสาหกรรมต่าง ๆ ด้วยหลักการง่าย ๆ แต่มีประสิทธิภาพสูง

 สนใจสอบถาม/สั่งซื้อ ทักเลย! 

บริษัท แอ๊กโซ เคมิคอลส์ แอนด์ เซอร์วิสเซส จำกัด

โทร 02 346 9239 ต่อ 11 หรือ Line @axxochem

www.axxo.co.th หรือ sales_chem@axxo.co.th